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小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)ELISA試劑盒原理

小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)ELISA試劑盒原理
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價格: 4900

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采購度:163    原產地:美洲

發布時間:2018/3/5 16:39:53

產品簡介:小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)ELISA試劑盒原理用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)的含量。

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詳細信息
小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)elisa試劑盒原理
 
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)elisa試劑盒原理標本要求
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

獨特優勢:

1.嚴格的質控體系:所有試劑盒從原料到成品經過嚴格的質控,確保試劑盒質量及穩定性;
2.產品經過不斷優化,具有很好的靈敏度;
3.綜合指標特性,研發便捷操作的試劑盒;
4.原裝進口分裝:專業的技術支持,可靠的實驗結果,優秀的產品質量,低廉的市場價格,實惠、經濟、可靠。

樣品收集、處理及保存方法
(1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
(2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
(3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
(4)組織勻漿-----將組織加入適量shengli鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
(5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

檢測前準備工作:

1. 請提前20分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正常現象,可用40℃水浴微加熱使結晶完全溶解后再配制洗滌液。(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
3. 標準品: 加入標準品&標本稀釋液1.0ml至凍干標準品中,靜置10分鐘,待其充分溶解后,輕輕混勻(濃度為5000 pg/ml)。然后根據需要進行倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度: 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。樣品稀釋液直接作為空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的EP管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
4. 生物素化抗體工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μl/孔計),實際配制時應多配制100-200μl。使用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。
5. 酶結合物工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μl/孔計),實際配制時應多配制 100-200μl。使用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。

操作注意事項

(1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
(2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
(3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
(4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
(5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
(6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
(7)底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
(8)加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
(9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

客戶評論

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3.部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日*新價格為準。
4.請辦理完后,將收據、底單等連同收貨人的地址、姓名、電話等以傳真、EMail、信息、電話等形式通知我們。
我公司ELISA試劑盒品種多,質量好,靈敏度高,涉及的品牌有美國R&D 原裝/分裝等不同價格檔次的盒子。提供免費代測服務,歡迎來電咨詢的詳細說明書。

更新時間:2024/10/8 9:18:53

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