在操作實驗的時候，不少新手會忽略了實驗的主要原理這一問題。ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點，今天上海恒遠帶您從ELISA研究視角來看實驗重點內容，ELISA實驗新手可要注意嘍！
對于一些小分子的檢測，比如前列腺素、糖皮質激素的檢測，可以選擇用競爭法ELISA去檢測，也要購買采用這個方法的盒子。一般細胞因子的檢測，都是采用常規的夾心法ELISA檢測，因為因子分子量比較大，一般10幾個KD左右，很容易找到兩個或者多個抗原表位。而小分子很難找到兩個不同的表位，也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結合小分子并固相化。解決方案就是酶標板上包被二抗，每個孔加入一定量的酶標的小分子，然后加樣品，再加不帶標記的檢測抗體，顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高，吸光度越低。 ·ELISA研究之浸泡式洗滌：
1. 吸干或甩干孔內反應液；
2. 用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去)；
3. 浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動，浸泡時間不可隨意縮短；
4. 吸干孔內液體。吸干應徹底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；
5. 重復操作c和d，洗滌3-4次(或按說明規定)。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數或延長浸泡時間。
微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合，從而削弱蛋白質與固相載體的結合，并借助于親水基團和水分子的結合作用，使蛋白質回復到水溶液狀態，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫 20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
ELISA研究也是要靠經驗總結的，做的多了自然就熟練了。了解更多的相關資料內容您可以在本網站中留言，也可以給我司業務員來電。
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