使用目的：

本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中骨粘連蛋白(ON)含量。

實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人骨粘連蛋白(ON)水平。用純化的人骨粘連蛋白(ON)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入骨粘連蛋白(ON)，再與HRP標記的骨粘連蛋白(ON)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的骨粘連蛋白(ON)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人骨粘連蛋白(ON)濃度。

標本要求

1． 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2． 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

注意事項

1． 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3． 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物請避光保存。

7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9． 本試劑不同批號組分不得混用。

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原創作者：上海恒遠生物科技有限公司