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技術(shù)講解:ELISA試劑盒標準曲線相關(guān)問題及解答

點擊次數(shù)：13072 發(fā)布時間：2016/7/13 9:40:39

實驗中，很多因素都能影響標準曲線的結(jié)果，其中就包括配制和操作。讓我們一起來看看吧！
我是否可以改變標準品的配制？
◆ 不可以。用指定的稀釋液適當稀釋的重組標準品如說明書中所示。
◆ 混合和溶解標準品時，應避免起泡。
◆ 溶解后的標準品靜置至少15分鐘（根據(jù)說明書）。在使用之前輕輕混勻，保證所有的固體已經(jīng)溶解。
◆ 制作標準曲線時，確保所有的稀釋步驟已經(jīng)準確完成。稀釋時注意及時更換槍頭。在移液之前將稀釋液充分混合。

elisa試劑盒洗滌方式怎樣影響我的標準曲線？
◆ 不完全的洗滌會降低測定精確性，導致不理想的標準曲線結(jié)果。確保洗板機的正常工作，確保酶標板各孔被充分洗滌卻不干燥。

移液方式怎樣影響我的標準曲線？
◆ 不合理的移液操作會導致高CV值和不理想曲線。
◆ 在制作標準曲線的過程中，不正確的移液方式會導致錯誤的稀釋，從而使錯誤的數(shù)值進入標準曲線中，或者產(chǎn)生非線性曲線。確保移液器正常工作。每孔中的液體體積不等可能就是移液器失靈或者槍頭使用不當所致。

ELISA試劑盒測定多個酶標板時是否可以使用同一條標準曲線？

◆ 在測定不同板中的樣品時，每一個板都對應一條標準曲線。技術(shù)錯誤或者不同的孵育情況，環(huán)境條件都會引起酶標板之間產(chǎn)生不同結(jié)果。一條標準曲線測定的樣品值必需是在相同環(huán)境下產(chǎn)生的，否則就是無效值。

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