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       ELISA法是免疫診斷中的一項新技術，現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。我們今天要講是elisa試劑盒的使用方法與制備方法。

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elisa試劑盒的使用方法

1、 血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、 保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

elisa試劑盒的制備方法

包括以下步驟：
1）抗原表位的計算機篩選；
2）抗原的制備；
3）血清的采集；
4）間接ELISA方法的建立；
5）間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證；
6）試劑盒的穩定性驗證；
7）對屠宰場進行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩定性合格、重復性好。應用本發明制得的試劑盒能有效檢出感染豬的戊型肝炎病毒，適用于大批量發病樣本的檢測，可用于豬戊肝的快速診斷，并預防、控制豬戊肝病毒的流行和阻斷戊肝病毒由豬向人傳播。

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                                                                                                                            2013-10-17

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